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虫草复方制剂对动脉粥样硬化的作用机制
发布时间:2015-12-23
摘要:研究红细胞(rbc)免疫粘附功能与动脉粥样硬化的关系,观察虫草复方制剂治疗动脉粥样硬化的作用和机制。
       来源:山东大学学报(医学版)
       作者:马骁,黎莉,管益君,张薇 (山东大学齐鲁医院心内科,山东济南250012)
       摘要 目的:研究红细胞(rbc)免疫粘附功能与动脉粥样硬化的关系,观察虫草复方制剂治疗动脉粥样硬化的作用和机制。方法:雄性家兔20只,喂饲高脂饲料12周,然后喂饲加虫草复方制剂的高脂饲料8周,测定高脂饲料前后和药物治疗后的红细胞c3b受体花环形成率(rbc—c3brr)、rbc免疫复合物花环形成率(rbc—icr)、循环免疫复合物(cic)和血脂水平;采用超声技术测量高脂饲料前后和药物治疗后兔腹主动脉最大内膜一中层厚度(imtm)。
       结果:与实验前比较,喂饲高脂饲料后血脂明显升高;imtm增厚[(0.32±0.02)mm vs(0.89±0.19)mm,p<0.01];rbc-c3brr 降低[(10.36±2.14)% vs (6.44±1.95)%,p<0.011;rbc-icr升高 [(13.25±2.97)% vs (20.27±3.02)%,p<0.01];cic升高[156.60±40.27 vs 537.55±141.95,p<0.01];血脂水平和cic均与imtm正相关。与喂饲高脂饲料后比较,药物治疗后血脂水平下降,imtm 降低[(0.89±0.19)mm vs(0.52±0.18)mm,p<0.001];rbc—c3brr 升高[(6.44±1.95)% vs(9.77±1.25)%,p<0.011];rbc-icr降低[(20.27±3.02)% vs(15.21±1.92)%,p<0.001];cic降低[537.55±141.95 vs 233.45±36.05,p<0.001]。结论:rbc免疫功能减低是动脉粥样硬化的重要危险因素之一,虫草复方制剂可能是一种有前途的抗动脉粥样硬化药物,值得深入研究。
       关键词:动脉硬化;玫瑰花结形成;冬虫夏草
       动脉粥样硬化是多因素协同作用所致的病理过程,病因尚不清楚,近年来免疫机制在动脉粥样硬化中的作用受到重视。本研究检测中药虫草复方制剂治疗喂饲高脂饲料前后兔红细胞(rbc)免疫粘附功能、血脂水平和腹主动脉最大内膜-中层厚度(imtm),旨在探讨虫草复方制剂对动脉粥样硬化的作用和机制。
       1 材料与方法
       1.1 实验动物 实验用4~5月龄雄性家兔20只,体重2.0~2.5 kg,由山东省实验动物中心提供。
       1.2 材料与仪器基础颗粒饲料由山东省实验动物中心提供,高脂饲料由普通颗粒饲料掺加l%胆固醇、6%猪油和l%食盐制成;虫草复方制剂由冬虫夏草,黄芪,丹参按比例研碎成粉,按100 g饲料掺加5 g中药配成造模料;聚乙二醇(peg),相对分子质量(mr)6000μ,购自广州医药站化学试剂分公司;酵母试剂由上海第二军医大学长海医院免疫室提供;致敏酵母采用1:12小鼠血清致敏;采用日产日立7170a型全自动生化分析仪测定血脂;腹主动脉检测使用美国惠普公司hp-5500型多普勒超声诊断仪,周围血管探头频率7.5 mhz。
       1.3 实验过程 动物单笼饲养,饮水不限,每日每只进食150 g饲料。基础饲料适应性饲养2周,稳定血脂和代谢水平,空腹股静脉采血测定血清总胆固醇(total cholesterol,tc),甘油三酯(triglyc-erides, tg),高密度脂蛋白胆固醇(high densitylipoprotein cholesterol,hdl-c),低密度脂蛋白胆固醇(1ow density lipoprotein cholesterol,ldl-c).红细胞c3b受体花环形成率(rosette rate of redblood cell c由receptor,rbc-c3brr),红细胞免疫复合物花环形成率(rosette rete of red blood cellimmune complexes,rbc-icr)及循环免疫复合物含量(cireulating immune compexes,cic),应用超声心动图周围血管探头测量免腹主动脉最大内膜.中层厚度(maxim intimal—medial thickness,imtm)。再给予高脂饲料喂饲12周,重复测定上述各指标。再喂饲含虫草复方制剂的高脂饲料8周,重复测定上述各项指标。
       1.4 血样测定所有血样均于清晨空腹采集股静脉血并在4h内完成检测。ch,tg,hdl-c,ldd-c均采用酶法测定。以rbc-c3brr表示红细胞c3b受体活性,以rbc-icr表示红细胞粘附免疫复合物含量,rbc-c3brr和rbc-icr采用郭峰等介绍的红细胞c3b受体花环法和红细胞免疫复合物花环法检测。cic采用周金黄等介绍的聚乙二醇沉淀法检测。
       1.5 腹主动脉imtm的测量实验兔仰卧位,四肢固定于检查台上。腹部备皮,应用血管探头沿腹正中线左侧,自上而下检测腹主动脉,分别取其短轴及长轴观测量腹主动脉内膜-中层厚度的最大值(imtm)。
       1.6 统计学处理 实验数据均用均数±标准差(x±s)表示,两均数间比较用t检验,变量间相互关系用直线相关分析。
       2 结 果
       2.1 血脂含量测定结果 喂饲高脂饲料12周后与基础状态比较,ch、tg、ldl-c均明显升高,hdl-c变化无统计学意义;喂饲虫草复方制剂饲料8周后与喂饲高脂饲料后比较,ch、tg、ldl-c减低,但仍较基础状态时高,hdl-c增高。
       2.2 红细胞免疫粘附功能及循环免疫复合物含量测定结果 与基础状态比较,喂饲高脂饲料后rbc-c3brr下降;rbc-icr和cic明显升高,喂饲虫草复方制剂饲料后,rbc-c3brr升高,rbc-icr和cic下降。
       2.3 腹主动脉imtm 测值结果 喂饲高脂饲料后腹主动脉imtm较基础状态明显增厚[(0.32±0.02)mm vs(0.89±0.19)mm,p<0.001];喂饲虫草复方制剂饲料后,imtm 下降[(0.89±0.19)mm vs(0.52±0.18)mm,p<0.001],但仍较基础状态时厚[(0.52±0.18)mm vs(0.32±0.02)mm,p<0.0l]。喂饲高脂饲料后腹主动脉imtm与ch正相关(r=0.78,p<0.001);与hdl-c负相关(r-0.60,p<0.01);与ldl-c正相关(r=0.79,p<0.001)。cic含量与imtm呈正相关(r=0.63,p<0.01)。
       3 讨论
       imt增厚是动脉粥样硬化的典型病理特征,基础状态下兔腹主动脉内膜、中层、外膜二维超声显示呈典型的“双线征”,应用超声技术测量动脉imt的准确性已得到证实。本研究结果显示,喂饲高脂饲料后兔腹主动脉imt明显增厚,且血脂水平与imt增厚具有高度相关性,在活体动物模型上证实了高脂血症与动脉粥样硬化的关系。喂饲含虫草复方制剂的饲料后免腹主动脉imt变薄,表明该制剂对动脉粥样硬化病变有消退作用,同时亦证实超声技术检测动脉imt是观察动脉粥样硬化的形成和消退的可靠的无创性方法。
       动脉粥样硬化是多因素协同作用所致的病理过程,近年来动脉粥样硬化发生的免疫机制受到重视。其中cic沉积于血管壁造成免疫病理损伤被认为是动脉粥样硬化的重要危险因素之一,体内的cic主要由rbc清除,rbc免疫粘附功能下降,可致cic在体内大量堆积并沉积在血管壁上,与血管内皮细胞受体结合后,在蛋白水解酶和巨噬细胞的共同作用下,对内皮产生免疫性损伤嘲。此外rbc免疫粘附功能低下还可致机体对细菌,病毒等抗原清除作用下降,众多研究已表明动脉粥样硬化的发生、发展与肺炎衣原体、巨细胞病毒等感染密切相关,同时细菌和病毒感染也是造成血管内皮细胞损伤的重要危险因素。本研究结果显示,家兔喂饲高脂饲料后,rbc免疫功能出现异常,表现为rbc-c3brr明显下降,rbc-icr及cic含量则显著升高,说明喂饲高脂饲料后,兔红细胞膜上c3b受体活性下降或数量降低,c3b受体携带的免疫复合物(ic)含量增加。随着血脂的升高及免疫功能的异常,腹主动脉imt均较实验前明显增厚,相关分析表明,cic与腹主动脉imt呈正相关。上述结果提示,rbc免疫功能异常和cic在体内的大量堆积,是动脉粥样硬化的重要危险因素之一。
       本研究结果发现高脂血症兔应用虫草复方制剂后,腹主动脉imt值明显减低,表明虫草复方制剂具有抗动脉粥样硬化的作用。多项研究证实虫草复方制剂各组成成分具有调节机体的细胞和体液免疫,增进单核巨噬系统活性,提高rbc免疫功能等作用。本研究结果显示,应用虫草复方制剂后,血脂水平下降,rbc-c3brr增高,rbc-icr和cic减低。因此,我们认为虫草复方制剂可能通过降低血脂水平、提高红细胞免疫粘附功能、促进cic的运送和处理等机制消退实验性早期动脉粥样硬化。
       综上所述,rbc免疫功能减低是动脉粥样硬化的重要危险因素之一,虫草复方制剂可能是一种有前途的抗动脉粥样硬化药物,值得深入研究。

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